پزشکی بازساختی و سلول‌های بنیادی

 در این پرسش و پاسخ، دکتر دوون شیدلاک خط تولید درمان سرطان Poseida Therapeutics و پیشرفت هایی را که در جهت توسعه درمان های سلول T با گیرنده آنتی ژن کایمریک (CAR) برای تومورهای خونی و جامد انجام داده است، مورد بحث قرار میدهد.

 آیا می توانید خط تولید سلول درمانی در پوزیدا را توضیح دهید؟

 Poseida Therapeutics در حال توسعه یک کلاس جدید از درمان های سلولی و ژنی با ظرفیت درمان سرطان و بیماری های نادر است.  در سلول درمانی، ما معتقدیم سلول های CAR T آلوژنیک (allo) آینده مراقبت از سرطان هستند.  با استفاده از فناوریهای مهندسی ژنتیک اختصاصی خود، ما در حال پیشبرد خط تولیدی از محصولات مقاوم آلو CAR برای محصولات سلول T هستیم که برای ارائه یک درمان ایمن و کارآمد برای مولتیپل میلوما، بدخیمی های سلول B و انواع جامد تومورها طراحی شدهاند.

 ما مشتاقیم که سلولهای allo CAR T را که بدخیمیهای خونی را هدف قرار میدهند، با شریک سلول درمانی خود، Roche، که 1 در آگوست 2022 اعلام شد، توسعه دهیم و به پیشبرد برنامهه ای داخلی سلول های T CAR با تمرکز بر اندیکاسیون های تومور جامد ادامه دهیم.

 خط تولید سلول T allo CAR Poseida شامل موارد زیر است:

 • P-MUC1C-ALLO1: کاندیدی که ناحیه C ترمینال موسین-1 را هدف قرار می دهد که بر روی تومورهای جامد مشتق شده از سلول های اپیتلیال، از جمله سرطان سینه و تخمدان و بسیاری دیگر بیان می شود.


 • P-BCMA-ALLO1: نامزدی که آنتی ژن بلوغ سلولی B (BCMA) را هدف قرار می دهد، با همکاری Roche برای درمان مولتیپل میلوما عودکننده/ مقاوم ساخته شده است.

 • برنامه های دوگانه CAR allo: چندین کاندید که بدخیمی های خونی یا تومورهای جامد را در حال حاضر در مطالعات پیش بالینی هدف قرار می دهند.  اینها حاوی دو مولکول CAR کاملاً کاربردی برای هدف قرار دادن سلولهایی هستند که حداقل یکی از دو هدف مورد نظر را بیان میکنند.

 با توجه به یادگیری های مداوم از برنامه سلول T اتولوگ (خودکار) P-PSMA-101 ما که در حال حاضر در فاز I است، ما همچنین در حال توسعه P-PSMA-ALLO1 هستیم، یک محصول آلو CAR T-cell که آنتی ژن غشایی خاص پروستات را (PSMA) برای درمان سرطان پروستات مقاوم به اخته متاستاتیک (mCRPC) هدف قرار می دهد.

 چه کاری انجام می دهید که به ویژه نوآورانه است؟

 ما در حال توسعه درمان های سلول T allo CAR با استفاده از فناوری های اصلی پلتفرم مهندسی ژنتیک غیر ویروسی خود هستیم:

 • سیستم تحویل DNA Super PiggyBac®: یک فناوری غیر ویروسی که قادر به وارد کردن محمولههای ژنتیکی بزرگ در ژنوم سلول است.

 • سیستم ویرایش ژن اختصاصی سایت Cas-CLOVER™: یک سیستم ویرایش ژن با توانمندی بالا که میتواند حذف، درج و قرارگیری اختصاصی سایت را در بسیاری از انواع سلول، بدون اثرات غیراختصاصی انجام دهد.

 در Poseida، همه سلولهای allo CAR T ما دارای سلول های حافظه اولیه هستند، بهویژه بسیاری از سلولهای T حافظه سلولهای بنیادی (Tscm)، که انتظار داریم پاسخ ضد سرطانی تدریجیتر و بادوامتری را با سمیت کمتر ارائه دهند.  Tscm همچنین ممکن است بر محدودیتهای قدرت سلولهای CAR T در تومورهای جامد غلبه کند، زیرا این سلولها دارای ظرفیت تولید موج پس از موج سلولهای CAR T افکتور هستند.

 کارآزمایی های بالینی سلول T-CAR خودکار ما تأیید کرد که CAR Tscm با پاسخهای بالینی و همچنین درمان ایمنتر ارتباط دارد، که منجر به کاهش نرخ سندرم آزادسازی سیتوکین (CRS) و سمیت عصبی میشود، و نیاز به ویزیت کمتری در بخش مراقبتهای ویژه (ICU) دارد و این امکان را فراهم میکند تا  دوز بیمار در برخی موارد افزایش دهیم.  ما آموخته های برنامه خودکار P-BCMA-101 خود را در P-BCMA-ALLO1 گنجانده ایم.  علاوه بر این، رویکرد CAR دوگانه ما به از دست دادن آنتی ژن منفرد و بیان آنتی ژن ناهمگن می پردازد و به سرعت در حال پیشرفت به سمت کلینیک است.  مولکول تقویتکننده ما میتواند با کمک به جلوگیری از عواقب نامطلوب اختلال گیرنده سلول T (TCR) در طول تولید، که به شدت بر کیفیت و عملکرد محصول سلول T CAR تأثیر میگذارد، تا صدها دوز را در یک دوره تولید تولید کند.  علاوه بر این، تعداد زیادی از فنآوریهای نوآورانه در حال حاضر در دست توسعه هستند و آماده استقرار در کلینیک هستند تا در صورت نیاز، ایمنی، کارایی، دوام حضور و ماندگاری اثربخشی را افزایش دهند.

 مزایای اصلی درمان با سلول T CAR در برابر سرطان چیست؟

 سلولهای T برای استفاده در درمانهای سلولی علیه سرطان ایدهآل هستند، زیرا قادر به تکثیر گسترده و کشتن زنجیرهای در داخل بدن هستند و صدها یا هزار برابر گسترش مییابند تا به طور موثر سلولهای تومور را از بین ببرند و پاسخهای بالینی قوی ارائه دهند.  جزء حافظه اولیه یک محصول CAR T-cell، به ویژه Tscm (که با توانایی ماندگاری طولانی مدت، خود تجدید و چند توانی تعریف می شود)، ممکن است در طول زمان و در صورت عود تومور از آن محافظت کند.

 سایر روش های سلولی، مانند سلول های کشنده طبیعی CAR (NK) و ماکروفاژهای CAR، قادر به این سطح از تکثیر و ماندگاری نیستند و ممکن است برای دستیابی به نتایج قابل مقایسه به عنوان یک دوز واحد از یک محصول CAR Tscm با تکثیر بالا، به دوزهای متعدد نیاز داشته باشند.  سلول های CAR T مشتق شده از سلول های پرتوان القایی جدید هستند اما هنوز از نظر بالینی تایید نشده اند.  طبیعتاً، این سلولها مونوکلونال هستند و مشخص نیست که آیا مونوکلونال بودن مزیت عملکردی نسبت به درمان سنتیتر CAR T-cell CAR که در آن قرار دادن نیمه تصادفی ژن در ژنوم یک جمعیت پلی کلونال سلولهای T باعث ایجاد یک جمعیت پلی کلونال مشابه میشود، خواهد داشت یا خیر.  از کلون های ضد سرطان، که هر کدام مزایای عملکردی بالقوه جداگانه خود را دارند (مانند رشد، کشتن، تداوم).  به این ترتیب، یک محصول پلی کلونال CAR T-cell عملکردی ممکن است کنترل و محافظت مداوم تومور را در جمعیت بیماران متنوعی که تومور، ریزمحیط تومور یا بار تومور هر بیمار متمایز است، ارائه دهد.

 برخی از چالشها هنگام توسعه درمانهای CAR T-cell چیست؟  چگونه می توان بر اینها غلبه کرد؟

 تولید سلولهای T CAR اتولوگ در سطوح مختلف چالش برانگیز است، به همین دلیل است که ما و دیگران به سمت استراتژیهای تولید allo حرکت میکنیم.  به عنوان مثال، درمان با سلول T خودکار CAR فردی است، به تدارکات بیشتری نیاز دارد و سلول های T بیمار توسط چندین خط درمانی قبلی «شکست میخورند» و در بسیاری از موارد قویتر هستند.  این مسائل - همراه با چالشهای تولید، بازده سلولی متغیر و ترکیب فنوتیپی ضعیف محصول - از جمله دلایل زیادی است که ما تمرکز خود را از اتولوگ به allo تغییر دادهایم و چرا معتقدیم آینده سلول های CAR T آلو است.

 تولید Allo نسبت به تولید اتولوگ دارای کارایی بیشتری است، از جمله:

 • ترکیب فنوتیپی، کیفیت، مشخصات متابولیک، عملکرد و عملکرد سلول T-

CAR بهبود یافته است

 • پتانسیل درمان تا صدها بیمار از یک دوره تولید

 • کاهش قابل توجهی هزینه های تولید در هر دوز.

 برای سلول های آلو CAR T، یک مرحله اضافی لازم است تا محصول سالم مشتق شده از اهداکننده ایمن و مقاوم در برابر رد ایمنی در بیمار باشد.  سلول های اهداکننده ناسازگار آنتی ژن لکوسیت انسانی (HLA) معمولاً توسط سلول های T گیرنده رد می شوند.  ما از فناوری ویرایش ژن با وفاداری بالا، Cas-CLOVER، برای از بین بردن چندین هدف ایمنی کلیدی بیان شده بر روی سطح سلولهای آلو CAR T از جمله TCR و بتا-2 میکروگلوبولین (B2M)، یک جزء ساختاری حیاتی HLA، استفاده میکنیم.

 اختلال TCR برای جلوگیری از کشتن سلولهای بیمار یا ایجاد واکنشپذیری، که به عنوان بیماری پیوند در مقابل میزبان (GvHD) شناخته میشود، مورد نیاز است.  با این حال، فرض بر این است که این اصلاح، محرک اصلی پدیده ای است که "هزینه آلو" نام گرفته است.  این امر به این دلیل اتفاق میافتد که حذف TCR در طول تولید، پذیرش سلول را نسبت به معرفهای آگونیست ضد TCR از بین میبرد و در نتیجه باعث کاهش انبساط و کاهش دوزهای آلو CAR سلول T میشود.  در مقابل، مولکول تقویت کننده ما بر این معضل تولید غلبه می کند و می تواند تعداد دوزهای تولید شده از یک دوره تولید را به میزان قابل توجهی افزایش دهد.

 تصور میشود که اختلال B2M از سلولهای آلو CAR T در برابر رد سلولهای T بیمار (میزبان در مقابل پیوند یا HvG) محافظت میکند، که در غیر این صورت میتواند سلولهای CAR T را از بین ببرد و کارایی درمانی را محدود کند.  با این حال، حذف B2M همچنین ممکن است سلولهای آلو CAR T را مستعد کشتن توسط سلولهای NK بیمار کند، که اکنون ممکن است سلولهای CAR T با سطوح کاهش یافته HLA سطح را همانطور که توسط سلول NK

فرضیه «خود گمشده» یا «تهی» توصیف شده است، تشخیص دهند. با این حال، هنوز مشخص نیست که رد NK در کلینیک چقدر گسترده خواهد بود.  در Poseida، ما بر این باوریم که با تجویز یک محصول ترکیبی B2M (B2M+/B2M-) allo CAR T-cell میتوانیم عملکرد و ماندگاری هر دو جمعیت سلولهای allo CAR T در بیمار را در زمان واقعی نظارت کنیم و به ما این امکان را میدهد که از یادگیری برای  تولید محصولات سلول T آلو CAR بهتر استفاده کنیم.
 چالش دیگر ایجاد یک برنامه غربالگری موثر اهداکننده برای ایجاد یک مجموعه قوی و قابل اعتماد از اهداکنندگان ترجیحی آلو است.  این برای به حداکثر رساندن قابلیت ساخت و موفقیت در ساخت و همچنین تضمین تولید بدون وقفه بسیار مهم است.  علاوه بر این، مشارکت اهداکنندگان سالم ممکن است نامنظم یا محدود به یک یا تعداد بسیار کمی اهدا باشد.  نکته مهم، به عنوان یک موضوع ایمنی، محصولات آلو CAR T-cell باید عاری از عوامل خطرناک بالقوه (ویروسها، عفونتها و غیره) باشد که در غیر این صورت از تجویز آنها به بیماران جلوگیری میشود.  از طریق پیشرفتهای پلتفرمی متعدد، بهینه سازی فرآیند و روشهای غربالگری، ما بر این باوریم که با ایجاد و حفظ مجموعه ای از اهداکنندگان سالم با قابلیت تولید بالا، بر بیشتر این چالشها غلبه کردهایم.

 آیا می توانید برنامه خود را به صورت تومورهای جامد هدفمند مشخص کنید؟  این کاندیدها چگونه کار می کنند؟

 در Poseida، ما معتقدیم که محصول آلو در برابر تومورهای جامد باید حداقل برای سلولهای CAR T حافظه اولیه، بهویژه Tscm، همانطور که در برنامه P-PSMA-101 خودکار ما تجربه شده است، غنی شود.  از نظر تئوری، این Tscm میتوانند پیوند بزنند، باقی بمانند و موجی پس از موج سلولهای متمایزتر را برای حمله به تومور تولید کنند.  ما اکنون از این آموخته ها در توسعه P-MUC1C-ALLO1 استفاده می کنیم که تومورهای جامد مشتق شده از اپیتلیال را هدف قرار می دهد.  با این حال، ثابت شده است که تومورهای جامد دشوارتر از بدخیمیهای هماتولوژیک هستند و ممکن است به زرهها و

فنآوری های اضافی برای افزایش عملکرد و/یا ماندگاری سلولهای T allo CAR در هنگام هدف قرار دادن سلولهای تومور در یک ریزمحیط بسیار سرکوبکننده ایمنی نیاز باشد.  برای مثال، استراتژیها ممکن است شامل کاهش پذیرش سلولهای آلو CAR T نسبت به سیگنالهای نقاط وارسی (PD1، Lag3، Tim3، و غیره)، شرایط بهتر در طول ساخت یا استقرار سیستم های ناشی از فعالسازی باشد که در آن بیان موضعی ژنهای درمانی ممکن است قدرت یا مزایای ایمنی را ارائه دهد.

 آینده درمان های سلولی در پوزیدا چگونه است؟

 ما بر این باوریم که آینده سلول های CAR T همه چیز است.  فراتر از آنچه در بالا ذکر شد، رویکرد سلول T دوگانه CAR ما به از دست دادن آنتی ژن منفرد و بیان آنتی ژن ناهمگن برای اثربخشی بهتر در تومورهای هماتولوژیک و تومورهای جامد می پردازد.  اولین برنامه سلول T دوگانه ما P-CD19CD20-ALLO1 است، که اکنون با Roche شریک شده و با برنامه تحقیقاتی داروی جدید (IND) که در اواخر سال 2023 انتظار میرود، به سمت کلینیک حرکت میکند.  امید است که بسیاری از بیماران با سلول های یک اهدا کننده سالم درمان شوند.  در نهایت، رویکرد جدید ما برای درمان با سلول T allo CAR برای بهبود کارایی و ایمنی، کاهش چشمگیر هزینههای تولید این محصولات و گسترش دسترسی بیماران - با هدف ارائه درمان های جدید و بهتر برای بیماران نیازمند طراحی شده است.



https://www.drugtargetreview.com/article/106685/allogeneic-car-t-cell-therapy-the-future-of-cancer-care/